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Leica顯微鏡浸沒鏡油技術(shù)指南

更新時間:2025-04-09      點擊次數(shù):365

Leica顯微鏡浸沒鏡油技術(shù)指南

——高分辨率成像的關(guān)鍵要素

 

一、浸沒油原理與光學(xué)意義

浸沒油通過填補物鏡前端與樣本蓋玻片之間的空氣間隙(n=1.0),匹配玻璃折射率(n1.515),顯著提升數(shù)值孔徑(NA)并減少光散射。Leica油鏡(如100x/1.47 NA)通過浸沒油可實現(xiàn):

 

分辨率提升約30%(理論分辨率=0.61λ/NA

 

增強圖像對比度與信噪比

 

減少球面像差(尤其厚樣本成像時)

 

二、Leica鏡油核心技術(shù)參數(shù)

型號 折射率(n) @23°C 動態(tài)粘度(cSt) 適用場景

Type F 1.518 (±0.0005) 300 常規(guī)熒光/明場(ISO 8036標(biāo)準(zhǔn))

Type DF 1.515 150 快速掃描活細(xì)胞成像

UV兼容型 1.518 280 多光子/深紫外激發(fā)

關(guān)鍵特性:

 

嚴(yán)格色散匹配(Δn<0.0003 across 450-700nm

 

零熒光背景(經(jīng)HPLC純化)

 

抗結(jié)晶配方(長期穩(wěn)定性>2年)

 

三、操作規(guī)范與常見問題

1. 正確使用方法

 

滴加量:1-2滴(覆蓋物鏡前透鏡80%面積)

 

清潔流程:

 

復(fù)制

1. Leica專用清潔紙(無纖維殘留)  

2. 二甲苯擦拭殘留油漬(僅限非塑料部件)  

3. 乙醇去除溶劑殘留(純度≥99.7%)  

2. 故障排除

 

現(xiàn)象 可能原因 解決方案

圖像邊緣模糊 油層中有氣泡 輕轉(zhuǎn)調(diào)焦旋鈕排除氣泡

熒光強度衰減 油劑光降解 更換UV穩(wěn)定型鏡油

油劑結(jié)晶 溫濕度驟變 恒溫儲存(18-25°C

四、特殊應(yīng)用場景優(yōu)化

活細(xì)胞成像:使用低粘度Type DF油(剪切力降低60%

 

三維重構(gòu):需每4小時補油(蒸發(fā)率<0.1μL/h @37°C

 

共聚焦成像:選擇抗光漂白型號(透光率>99% @488/561nm

 

五、技術(shù)驗證數(shù)據(jù)

Leica鏡油經(jīng)ISO 10993-5細(xì)胞毒性認(rèn)證,與主流封片劑(如ProLong Diamond)兼容性測試:

 

無交聯(lián)反應(yīng)(接觸48小時后ΔRI0.0001

 

熒光淬滅率<2%/h(對比競品平均5-8%/h

 

文檔設(shè)計建議:

 

添加Leica提供的折射率-波長曲線圖

 

附錄包含物鏡兼容性對照表(如HC PL APO系列)

 

重點數(shù)據(jù)用高亮文本框強調(diào)


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